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巴戟天的优良品种的选育
信息来源:岭南中药网收集
发布时间:2014/10/14
巴戟天是我国名贵中药材,以根入药,临床具有广泛的用途。巴戟天生产多用藤蔓扦插法,但藤蔓来源不同,种苗混杂,良种短缺,并易感染真菌性的茎基腐病,使药材质量和产量下降,这也是目前种植生产上急需解决的难题。而通过组织培养可进行优良品系的筛选,可改变这一状况,同时也为加速巴戟天优良品种的推广开辟了广阔的道路,并为探索工业化生产巴戟天药用成分的可能性提供依据。下面介绍巴戟天组织培养常见的培养基及培养方法。 (1)组织培养的材料及其影响因素 1)材料与方法 选择材料巴戟天(Morinda.officinalis.How) 3年生的芽或其他部位,切成0.4~0.7cm的根段作为材料,接种于培养基上,进行固态静止培养。材料要求:从植株群体中选择生长旺盛,株型正常,向上伸长,茎秆粗壮,叶色浓绿,块根形成早(一般一年生单株根重50~60g),抗逆性强(抗干旱、抗病虫害)等优良性状的植株。
所有植物细胞均含有能产生全部植物性状的全套遗传基因,即具有细胞的“全能性”,当在一定的条件下和外源植物激素的刺激下,就可以重新分化生长成再生植株。这是试管苗培养的理论基础。因此,培养基中外源激素的种类和配比对试管苗的培养至关重要。大量的研究表明,由外植体经分化产生愈伤组织后,愈伤组织的再分化产生根或芽取决于生长素和细胞分裂素的比值,当细胞分裂素比值较高时,则诱导芽的形成,而两者的比值低时则诱导根的分化。据此规律,我们分别设计了多种增殖和生根培养基的方法。具体如下。 剪取顶芽、腋芽、茎段和叶片等作为起始培养的外植体,经消毒处理后切成约0.5cm长,在无菌条件下将其接种于固体琼脂培养基上培养。
(2)巴戟天组织培养的影响因素 在下列不同因素条件下考察对巴戟天试管苗的影响。 1)在不同激素浓度配比的培养基中(表11-5)进行培养 首先筛选出有合适激素配比的增殖培养基,使外植体经愈伤组织而分化出大量的不定芽(见彩图11-11)。基本培养基为从MS培养基,琼脂用量为0.9%培养基中按需添加的植物生长素类:吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)和叭萘乙酸(NAA);植物细胞分裂素类:苄基腺嘌呤(BA)和玉米素(ZT);赤霉素类:GA3。培养基的PH稳定在5.8~6.0,培养温度为(25±2℃),光照时间8~12h光照强度150~200lx,培养室的空气相对湿度为80%以上。
表11-5培养基不同激素浓度配比
巴戟天的优良品种的选育(二)
1.不同外植体对愈伤组织诱导率和不定芽分化率的影响 在两组不同激素组合的培养基上接种的外植体,效果虽有差异(表11-6),但愈伤组织诱导率和不定芽分化率都是顶芽和腋芽的百分率高。 表11-6巴戟天外植体对培养效果的影响
注:以上为培养40天的统计数。 2.不同激素浓度配比的培养基对试管苗愈伤组织诱导率的影响 将外植体接种到不同激素配比的6种培养基上(表11-7),1周后可见到绿色微凸的芽点,3周后芽点明显增大,长出愈伤组织,并有部分长出新叶,直接分化出丛生芽,其中编号4培养基愈伤组织诱导率达86.7%,经过80天培养,愈伤组织体积增加近7倍。
表11-7不同激素浓度配比对愈伤组织诱导率的影响
注:以上为培养40天的统计数。
3.不同激素浓度配比的培养基对愈伤组织不定芽分化率的影响 将愈伤组织或丛生芽分开,转移到不同激素浓度配比的6种培养基上(表11-8),3周后转一次培养基,其中编号11培养基效果最好,芽分化率达100%。 表11-8不同激素浓度配比对不定芽分化率的影响
4.不同激素浓度配比的培养基对试管苗根分化率的影响
将长至2~3cm髙的丛生小苗,转移至不同激素浓度配比的6种培养基上(表11-9),经2周培养后开始生根,逐渐形成苗根齐全的完整植株,其中编号16的培养基效果最佳,生根率达92.6%。 表11-9不同激素浓度配比对根分化的影响
注:以上为培养30天的统计数。
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