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广藿香的育苗技术——组织培养繁殖
信息来源:岭南中药网收集
发布时间:2014/11/19
(1)外植体的选择和准备 在广藿香的根尖、叶片、带节茎段等不同部位中,以叶片和带节茎段作外植体的愈伤组织涛导率最高,达到87.0%以上,而根尖和茎段的愈伤组织诱导率仪为27.O%~46.5%。故在广覆香组培繁殖中选择叶片、带节茎段 1篙鬻淼磊;苔粟弄磊赫赫毗然后用作外植株最合适。取广藿香幼嫩茎,去掉叶片,以及从顶芽向下的第2~3节叶片,置自来水下流水冲洗15 min。然后用75%乙醇浸泡30 s,取出,用无菌水冲洗5~6次;再用0.1%的升汞浸泡8 min,取出,用无菌水冲洗6~8次,再用0.1%的升汞浸泡7 min,取出,用无菌水冲洗8次。把消毒好的茎切成1~1.5 cm长的小段,叶切成2cm x 2cm的小块,接种到愈伤组织诱导培养基或芽分化诱导培养基上培养。
(2)培养基的设计以及植株再生 愈伤组织诱导培养基或芽分化诱导培养基上培养。愈伤组织诱导培养基和芽分化诱导培养基以MS为基本博养基(由于Murashige和Skoog两人发明了此培养基,警鬯些两人的姓名第l个字母命名为MS)或改良后的MS为基本培养基,添加一定浓度的6一BA(6-苄基腺嘌呤)促进分化。由于广藿香本身内源激素水平较高,即使不添加任何激素,培养时间长了也能自己分化成苗。因此,培养基中激素浓度宜低不宜高,否则会过多地形成许多根,从而抑制了芽的分化和苗的生长。试验结果表明,愈伤组织诱导在MS的基础上,6-BA的浓度在0.3~0.5 mg/L为宜,接种30天后,可形成大量淡绿色的胚性愈伤组织,并很快分化出许多丛芽和长出真叶的小苗。在改良后的MS培养基的基础上,添加6-BA 0.5mg/L,可不通过愈伤组织阶段,直接分化出再生植株。 生根壮苗培养基以改良后的Ms培养基为基础,添加15%~20%的香蕉汁,以促进广藿香苗生根和增粗生长。选取高1~2。有1~3对真叶的小苗,转接到生根壮苗培养基中培养,25天后,植株长到6~8 cm高,并长出根时,即可出瓶炼苗。
(3)再生植株的移栽 在瓶里已经长好根的植株,可直接移到室外沙质苗床上进行炼苗。炼苗时,提前一天把瓶盖拧开,轻轻地放在瓶口上,呈半掩状态。1天后取出试管苗,轻轻地在水盆中荡洗干净根部琼脂,然后移栽到室外准备好的沙质苗床上,浇透水,并用竹片条插在苗床两侧弯成拱形,盖上塑料薄膜保湿,同时苗床上空要用遮阳网遮掉55%的阳光。每天打开薄膜喷水2~3次,约3天即开始发根,5天左右就可定根,成活率可达95%以上。l个月后便可移栽到大田。这种方法既简便又经济,适于广藿香试管苗的大批量产业化生产。
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